@phdthesis{phdthesis,
  keywords = {Hansen{\'\i}ase, tratamento, rea{\c c}{\~a}o em cadeia da  polimerase em tempo real, transmiss{\~a}o, diagn{\'o}stico},
  author = {Santos LSD},
  title = {Quantifica{\c c}{\~a}o do dna de Mycobacterium Leprae em diferentes camadas da pele: estudo sobre elimina{\c c}{\~a}o transepid{\'e}rmica, progress{\~a}o para cura e transmiss{\~a}o},
  abstract = {<p>O progresso das t{\'e}cnicas moleculares foi primordial para o diagn{\'o}stico pr{\'e}vio da hansen{\'\i}ase. Por{\'e}m, os atuais estudos na {\'a}rea ainda n{\~a}o conseguiram esclarecer o desempenho dessas t{\'e}cnicas na pr{\'a}tica cl{\'\i}nica. O presente projeto teve como objetivo principal testar na pr{\'a}tica cl{\'\i}nica a acur{\'a}cia, sensibilidade e especificidade de um novo par de iniciadores desenvolvido para o alvo do elemento repetitivo (RLEP) do Mycobacterium leprae. Al{\'e}m disso, como objetivo secund{\'a}rio, buscou-se identificar o potencial de transmiss{\~a}o de pacientes com hansen{\'\i}ase multibacilar e paucibacilar. Desta forma, foi realizado um estudo de coorte transversal de acur{\'a}cia diagn{\'o}sticacom um total de cem pacientes com quadro cl{\'\i}nico compat{\'\i}vel com hansen{\'\i}ase. Nesse estudo, utilizou-se a Rea{\c c}{\~a}o em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) para quantificar o M. leprae nas diferentes camadas da pele e em swab nasal. As amostras de pele foram divididas em quatro camadas: epiderme, derme superior, derme inferior e hipoderme. Os resultados da quantifica{\c c}{\~a}o do bacilo nas amostras de swabs nasais foram relacionados ao n{\'u}mero de contatos intradomiciliares. Como crit{\'e}rio de positividade para a rea{\c c}{\~a}o da qPCR, foram estabelecidos tr{\^e}s pontos de corte: 1 - qualquer DNA de bacilo quantific{\'a}vel, 2 - quantifica{\c c}{\~a}o acima ou igual a 0,1 bacilo, 3 - quantifica{\c c}{\~a}o acima ou igual a 1 bacilo. A valida{\c c}{\~a}o da quantifica{\c c}{\~a}o in vitroda rea{\c c}{\~a}o resultou em um limite de quantifica{\c c}{\~a}o de 0,03 bacilos. A melhor sensibilidade foi observada na derme superior de acordo com o primeiro ponto de corte estabelecido [sensibilidade = 59,26\% (IC 95\% = 45,97 {\textendash} 71,32)]. Na epiderme, o terceiro ponto de corte resultou em 100\% de especificidade (IC 95\% = 92,29 - 100). A melhor acur{\'a}cia foi encontrada na hipoderme no primeiro ponto de corte [acur{\'a}cia = 68,09\% (95\% CI = 58,11 {\textendash} 76,64)]. Para as amostras de swab, a melhor sensibilidade foi de 20,83\% (95\% CI = 11,73 {\textendash} 34,26), e foi alcan{\c c}ada no primeiro ponto de corte. Nos tr{\^e}s pontos de corte testados, foi obtida 100\% de especificidade nas amostras de swab. O n{\'u}mero de bacilos encontrados nos swabs nasais n{\~a}o teve rela{\c c}{\~a}o significativa com o n{\'u}mero de contatos domiciliares tamb{\'e}m diagnosticados com hansen{\'\i}ase. Pacientes paucibacilares testaram positivo apenas para fragmentos de bacilo em swabs nasais, mas n{\~a}o para o bacilo inteiro. Este fato demonstra que pacientes paucibacilares podem n{\~a}o ser uma fonte relevante de transmiss{\~a}o da doen{\c c}a. Concluiu-se que diferentes tipos de amostras de pele t{\^e}m pouca influ{\^e}ncia na acur{\'a}cia do teste de qPCR. Por{\'e}m, em contraste com esse resultado, diferentes pontos de corte podem influenciar na acur{\'a}cia, sensibilidade e especificidade do teste de qPCR.</p>
},
  year = {2023},
  journal = {Faculdade de Medicina},
  pages = {1-72},
  publisher = {Universidade de Bras{\'\i}lia},
  url = {http://www.rlbea.unb.br/jspui/bitstream/10482/50006/1/LaisSevilhaDosSantos_TESE.pdf},
  language = {POR},
}